什么是原生质体的微室培养法？

有微室培养法和纸桥培养法。微室培养法（culture：in：a：microchamber）是指人工制造一个微室，将原生质体培养在微室中的少量培养基中，使其分裂增殖形成细胞团的方法。这一方法是由Jones等人（1960）设计的，其中用条件培养基（conditioned：medium）代替了看护组织，将原生质体置于微室中进行培养。

这个方法的主要优点是：在培养过程中可以连续进行显微观察，将一个细胞的生长、分裂和形成细胞团的全过程记录下来。

微室培养法的具体做法是先由悬浮培养物中取出一滴只含有一个原生质体的培养液，置于一张无菌载玻片上，在这滴培养液的四周与之隔一定距离加上一圈石蜡油，构成微室的“围墙”，在“围墙”左右两侧再各加一滴石蜡油，每滴之上置一张盖玻片作为微室的“支柱”，然后将第三张盖架在两个“支柱”之间，构成微室的“屋顶”，于是那滴含有单细胞的培养液就被覆盖于微室中。构成“围墙”的石蜡油能阻止微室中水分的丢失，但不妨碍气体的交换。

最后把上面筑有微室的整张载玻片置于培养皿中进行培养。当细胞团长到一定大小后，揭掉盖玻片，把细胞团转移到新鲜的液体或半固体培养基上进行培养。在难以获得足够数量的细胞时，可采用微室培养法进行培养，以保证原生质体的培养成功。纸桥培养法（paper：wick：method）是植物茎尖分生组织培养常用的方法，有时也可用于原生质体培养。其具体做法是将滤纸的两端浸入液体培养基中，使滤纸的中央部分露出培养基表面，将所要培养的细胞放置于滤纸上进行培养。

Bigot（1976）对该方法进行了改进，制作一特制三角瓶，使其底部一部分向上突起，在突起处放上滤纸，用这种方法的优点是培养物不易干燥。